Frage:
Wie soll ich Plasmide versenden?
Nick T
2011-12-15 03:26:35 UTC
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Ich habe 10 µl meines Vektor-Miniprep in einem 1,5-ml-Eppendorf-Parafilm verschlossen und mit etwas Papierhandtuchpolsterung in einen 50-ml-Kegel gefüllt. Unterwegs passierte jedoch etwas und es befand sich nichts (keine Flüssigkeit) in der Röhre, als sie ankam. Sie haben keine Kommentare zu dem aufspringenden Mikrozentrifugenröhrchen oder dem zerbrochenen Parafilm abgegeben, sodass nichts Verrücktes passiert ist, aber etwas ist passiert.

Was ist der zuverlässigste Weg, um Plasmide zu versenden?

Sechs antworten:
#1
+17
Jonas
2011-12-15 03:38:37 UTC
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Ein ziemlich sicherer Weg, Plasmide zu versenden, besteht darin, sie auf Filterpapier zu legen (siehe Protokoll und einen Brief zu senden. Viel billiger.

+1 Schnell, einfach und sehr stabil, auch für Sendungen nach Übersee.
Außerdem ist der Zoll bei einem Stück Papier viel weniger pingelig als bei allem, was flüssig ist.
Dies ist der beste Weg. Sie können das Filterpapier auch für alle Fälle in etwas Frischhaltefolie einwickeln.
#2
+12
AnnaF
2011-12-15 03:37:16 UTC
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Haben sie versucht, das Röhrchen zu zentrifugieren, als es dort ankam, um die gesamte Flüssigkeit auf den Boden zu drücken? Ich weiß, dass besonders wenn wir mit so kleinen Mengen arbeiten, dass selbst ein wenig Schütteln den Inhalt über das gesamte Röhrchen verteilen kann. Wir haben bereits Plasmide aus anderen Labors erhalten. Im Allgemeinen werden die Plasmide in Mikrozentrifugenröhrchen mit Schraubverschluss in einer Art Kanister verschickt. Dies wird dann in einem kleinen Schaumkühler mit Trockeneis verpackt, um alles kalt zu halten.

#3
+12
Mac Cowell
2011-12-15 04:36:41 UTC
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Zusammenfassung

  • Die 10 ul Plasmid-Miniprep wurden möglicherweise in die Kappe des Röhrchens (AnnaF)
  • des Eppendorf-Röhrchens gespritzt Möglicherweise war der Lufttransport während des Luftversands drucklos und die 10 ul konnten entweichen und verdampfen.
  • Lösung: Versuchen Sie, Ihre Minipreps vor dem Luftversand an der Luft zu trocknen oder zu tupfen (Jonas).
    • p> Details

      Wie AnnaF schrieb, könnten die 10 ul Ihres Plasmids in der Kappe versteckt oder um das Röhrchen verteilt gewesen sein und leer erscheinen lassen. Sie sollten sich bei Ihren Mitarbeitern erkundigen, ob sie es zentrifugiert haben.

      Laut einem Fedex-Dokument zum Versand verderblicher Güter (pdf) und einem -Papier, das die Temperatur und den Druck von Lufttransporte (pdf), Fedex und Ups Lufttransporte können Niederdruckumgebungen zwischen 0,56 und 0,74 Atmosphären (atm) ausgesetzt sein. Bei diesen relativ niedrigen Drücken könnte möglicherweise ein bei 1 atm versiegeltes Eppendorf-Rohr brechen. In den Zeitungen wird auch darauf hingewiesen, dass Bodensendungen, die über die Rocky Mountains (dh in Colorado) verlaufen, ~ 0,64 atm aufweisen können.

      Vielleicht ist Ihr 1,5-ml-Eppendorf-Röhrchen während des Versands drucklos?

      Es Es wäre interessant, einige Tests zur Druckfestigkeit von Eppendorf-Röhren durchzuführen.

      In Bezug auf die ursprüngliche Frage habe ich 2007 eine Bibliothek mit Tausenden von Minipreps vorbereitet und an Hunderte von Benutzern versendet (fedex). 1 ul Miniprep wurde in Vertiefungen von 384-Well-Platten abgefüllt und luftgetrocknet, dann mit Aluminium versiegelt und dann verschickt. Benutzer rehydrieren einen Brunnen mit 10 ul Wasser. Im Allgemeinen funktioniert es.

    #4
    +5
    chaoticdawn
    2011-12-22 04:14:23 UTC
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    Da Röhrchen in der Post zerkleinert werden können, ist der sicherste Weg, Plasmide zu versenden, ein paar ul in ein Filterpapier zu tropfen und es dann einzuwickeln, um es mit Parafilm zu versiegeln, und ein detailliertes Formular über seinen Inhalt auszufüllen.

    Viel Glück.

    #5
    +4
    gkadam
    2011-12-24 10:45:16 UTC
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    Wir sind in ähnliche Situationen geraten, als uns andere Labors Plasmide geschickt haben (oder wenn wir bei -20 alte Röhrchen aus Aufbewahrungsboxen herausgenommen haben) und seitdem die Filterpapiermethode angewendet haben. Ein weiterer zu beachtender Punkt ist, dass Sie beispielsweise 10 μl Wasser in das "leere" Röhrchen (Mac) geben und 1 μl für eine Transformation verwenden können. Es hat immer für uns funktioniert. DNA ist scheinbar unsichtbar!

    #6
    +1
    user560
    2012-03-04 09:38:57 UTC
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    Ich empfehle außerdem dringend, ein Mikrogramm Ihrer Plasmid-DNA auf ein Stück Filterpapier zu tupfen (das Filterpapier ist wichtig für die Extraktion auf der Empfangsseite). Es ist auch sehr, sehr hilfreich, wenn Sie die DNA-Menge (ungefähr) klar angeben und die getupfte DNA im Stift umkreisen, damit keine Unklarheiten hinsichtlich des Ausschneidens des Kreises aus Filterpapier, der die DNA enthält, bestehen Am Empfangsende sollten Sie das Papier immer sofort einfrieren oder die DNA in TE-Puffer oder Wasser vom Papier eluieren und dann einfrieren. Andernfalls wird die Plasmid-DNA möglicherweise durch DNAase abgebaut, und Sie müssen auf eine weitere Lieferung warten.



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